Erfelijkheidsanalyse naar
hypofosfatasie
Door: Iza Oostra
Groep: VL2H19
Datum: 4/3/2020
1
, Samenvatting
Bij dit onderzoek is er van een serummonster de enzymactiviteit bepaalt van alkalische fosfatase. Dit
werd gedaan door de enzymreacties van de verschillende bekende substraat concentraties 15 minuten
lang te laten lopen. Vervolgens zijn er extincties gemeten door een spectrofotometer bij een golflengte
van 405 nm. Aan de hand hiervan werden er 2 grafieken opgesteld, de Michaelis- Menten plot (MM-plot)
en de Lineweaver-Burk plot (LB-plot). Voor de MM-plot is de reactiesnelheid van het enzym uitgezet
tegen de substraat concentratie. In de grafiek wordt dit weergegeven als V0 in E/min tegen [S] in
mmol/L. De concentraties substraat zijn op voorhand berekend en de V0 is berekend door de netto
extinctie te delen door de gemeten tijd.
1
Voor de LB plot werd de uitkomst van uitgezet tegen de uitkomst van
Concentratie substraat
1
. Aan de hand van de formule die ontstaat uit de LB-plot is te berekenen wat de Vmax
Reactiesnelheid
is (maximale reactiesnelheid) en de Km waarde (de concentratie substraat bij ½ Vmax). Als de Vmax van
het monster lager ligt dan de referentiewaarde, het gemiddelde van alle gemeten monsters, heeft de
patiënt hypofosfatasie.
Berekend is een Vmax van 0,00582 E/min en de referentiewaarde was 0,0669 E/Min.
In het serum wat getest is in dit experiment werd geconcludeerd dat de patiënt hypofosfatasie heeft.
2
hypofosfatasie
Door: Iza Oostra
Groep: VL2H19
Datum: 4/3/2020
1
, Samenvatting
Bij dit onderzoek is er van een serummonster de enzymactiviteit bepaalt van alkalische fosfatase. Dit
werd gedaan door de enzymreacties van de verschillende bekende substraat concentraties 15 minuten
lang te laten lopen. Vervolgens zijn er extincties gemeten door een spectrofotometer bij een golflengte
van 405 nm. Aan de hand hiervan werden er 2 grafieken opgesteld, de Michaelis- Menten plot (MM-plot)
en de Lineweaver-Burk plot (LB-plot). Voor de MM-plot is de reactiesnelheid van het enzym uitgezet
tegen de substraat concentratie. In de grafiek wordt dit weergegeven als V0 in E/min tegen [S] in
mmol/L. De concentraties substraat zijn op voorhand berekend en de V0 is berekend door de netto
extinctie te delen door de gemeten tijd.
1
Voor de LB plot werd de uitkomst van uitgezet tegen de uitkomst van
Concentratie substraat
1
. Aan de hand van de formule die ontstaat uit de LB-plot is te berekenen wat de Vmax
Reactiesnelheid
is (maximale reactiesnelheid) en de Km waarde (de concentratie substraat bij ½ Vmax). Als de Vmax van
het monster lager ligt dan de referentiewaarde, het gemiddelde van alle gemeten monsters, heeft de
patiënt hypofosfatasie.
Berekend is een Vmax van 0,00582 E/min en de referentiewaarde was 0,0669 E/Min.
In het serum wat getest is in dit experiment werd geconcludeerd dat de patiënt hypofosfatasie heeft.
2
