RESEARCH STRATEGIES IN MICROBIOLOGY
Lara van der Linde
TLSC-RSM5V-18
THEMA 1: MODULATIE VAN DE IMMUUNRESPONS DOOR STAPHYLOCOCCUS AUREUS
Dit thema richt zich op gezondheid en ziektes, zoals infecties en immuniteit, geneesmiddelenontwikkeling en
analyse, gepersonaliseerde medicatie en effecten van verschillende behandelingen.
De thema’s waar de onderzoeksvragen zich op richten zijn o.a.: gastheer-microbiële interacties (anti-
inflammatoire producten van bacteriën, intracellulaire pathogenen); de fenotypische diversiteit van bacteriën
(Mycobacterium tuberculosis; microbiële pathogenese (invasie mechanismen van Campylobacter jejuni en de
virulentie factoren van pneumokokken); Microbioom (de rol van gezonde bacteriën in de darmmicrobiota).
Commensaal die ernstige infecties kan geven: S. aureus. Huidinfecties, voedselvergiftiging, SSSS, osteomyelitis,
longontsteking. Dit maakt een aureus zeer virulent.
Diversiteit aan Staphylococcus aureus infecties
Afweer tegen invasie van micro-organismen: ontstekingsreactie
,Eerste afweermechanisme tegen micro-organismen
• Neutrofiel
• PMN’s
• Cellen van de aangeboren afweer
- Granulocyten
- Monocyten/macrofagen
- Dendritische cellen.
C5a is een krachtig eiwit dat gaat diffunderen in de omgeving. Het bereikt de bloedvaten en dat heeft een
effect met de cytokinen van de macrofagen. Hierdoor krijgen de granulocyten een andere
die granulocyten gaan hechten aan de endotheelcellen. Dan krijg je transmigratie door de endotheelwand en
dat zorgt ervoor dat hij buiten de bloedvaatwand is gekomen. Door de oplopende concentratie C5a gaat de
granulocyt door chemotaxis naar de plek van infectie. Die granulocyt fagocyteert dan de bacterie en doodt
deze.
C5a zorgt voor de chemotaxis.
Welke processen (activiteiten) van de leukocyt heb je hier waargenomen?
Welke eiwitten van het humane afweer zijn hierbij van belang
• Complement systeem
- C3b, C3bi -> labelen van bacterie
- C5a -> chemo-attractants
- C5b – C9 -> lysis van gram negatieve bacteriën.
Opsonisatie van bacteriën met C3b en IgG
,Dankzij de aanwezigheid van complement is fagocytose veel efficiënter.
Chemotaxis
• C3a en C5a verhogen de inflammatoire response door het binden van mestcellen en ervoor te zorgen
dat zij histamine vrijlaten.
• Meest sterke chemotactische factor bekend voor leukocyten.
1. CHIPS binding to Blood cells
• Onderzoeksvragen
- Aan welke type bloedcellen bindt CHIPS?
- Wat is de bindingscapaciteit van CHIPS aan de cel?
Op welke wijze zou een bacterie het proces van ontsteking kunnen beïnvloeden?
• Opsonisatie ontwijken
• Afgifte C5a verminderen -> CHIPS (Chemotaxis Inhibitory Protein of Staphylococci).
Flow cytometer
, • Cellen labelen met specifieke antistoffen gericht tegen celmembraan eiwitten (Ag).
• Antistoffen hebben een fluorescent label met verschillende kleuren.
• ‘single’ celstroom door nauwe opening leiden langs laser.
• Laser detecteert fluorescentie label en granulariteit van de cellen.
• Identificeren + isoleren
• Data-analyse
- Dotplot
- histogram
Dotplot flowcytometer
Forward scatter meet grootte
Side scatter meet licht dat is afgebogen. Hoeveelheid granula.
Flow cytometry; from dot plot to a 1 parameter histogram
Gating: mean and median of subpopulations.
Lara van der Linde
TLSC-RSM5V-18
THEMA 1: MODULATIE VAN DE IMMUUNRESPONS DOOR STAPHYLOCOCCUS AUREUS
Dit thema richt zich op gezondheid en ziektes, zoals infecties en immuniteit, geneesmiddelenontwikkeling en
analyse, gepersonaliseerde medicatie en effecten van verschillende behandelingen.
De thema’s waar de onderzoeksvragen zich op richten zijn o.a.: gastheer-microbiële interacties (anti-
inflammatoire producten van bacteriën, intracellulaire pathogenen); de fenotypische diversiteit van bacteriën
(Mycobacterium tuberculosis; microbiële pathogenese (invasie mechanismen van Campylobacter jejuni en de
virulentie factoren van pneumokokken); Microbioom (de rol van gezonde bacteriën in de darmmicrobiota).
Commensaal die ernstige infecties kan geven: S. aureus. Huidinfecties, voedselvergiftiging, SSSS, osteomyelitis,
longontsteking. Dit maakt een aureus zeer virulent.
Diversiteit aan Staphylococcus aureus infecties
Afweer tegen invasie van micro-organismen: ontstekingsreactie
,Eerste afweermechanisme tegen micro-organismen
• Neutrofiel
• PMN’s
• Cellen van de aangeboren afweer
- Granulocyten
- Monocyten/macrofagen
- Dendritische cellen.
C5a is een krachtig eiwit dat gaat diffunderen in de omgeving. Het bereikt de bloedvaten en dat heeft een
effect met de cytokinen van de macrofagen. Hierdoor krijgen de granulocyten een andere
die granulocyten gaan hechten aan de endotheelcellen. Dan krijg je transmigratie door de endotheelwand en
dat zorgt ervoor dat hij buiten de bloedvaatwand is gekomen. Door de oplopende concentratie C5a gaat de
granulocyt door chemotaxis naar de plek van infectie. Die granulocyt fagocyteert dan de bacterie en doodt
deze.
C5a zorgt voor de chemotaxis.
Welke processen (activiteiten) van de leukocyt heb je hier waargenomen?
Welke eiwitten van het humane afweer zijn hierbij van belang
• Complement systeem
- C3b, C3bi -> labelen van bacterie
- C5a -> chemo-attractants
- C5b – C9 -> lysis van gram negatieve bacteriën.
Opsonisatie van bacteriën met C3b en IgG
,Dankzij de aanwezigheid van complement is fagocytose veel efficiënter.
Chemotaxis
• C3a en C5a verhogen de inflammatoire response door het binden van mestcellen en ervoor te zorgen
dat zij histamine vrijlaten.
• Meest sterke chemotactische factor bekend voor leukocyten.
1. CHIPS binding to Blood cells
• Onderzoeksvragen
- Aan welke type bloedcellen bindt CHIPS?
- Wat is de bindingscapaciteit van CHIPS aan de cel?
Op welke wijze zou een bacterie het proces van ontsteking kunnen beïnvloeden?
• Opsonisatie ontwijken
• Afgifte C5a verminderen -> CHIPS (Chemotaxis Inhibitory Protein of Staphylococci).
Flow cytometer
, • Cellen labelen met specifieke antistoffen gericht tegen celmembraan eiwitten (Ag).
• Antistoffen hebben een fluorescent label met verschillende kleuren.
• ‘single’ celstroom door nauwe opening leiden langs laser.
• Laser detecteert fluorescentie label en granulariteit van de cellen.
• Identificeren + isoleren
• Data-analyse
- Dotplot
- histogram
Dotplot flowcytometer
Forward scatter meet grootte
Side scatter meet licht dat is afgebogen. Hoeveelheid granula.
Flow cytometry; from dot plot to a 1 parameter histogram
Gating: mean and median of subpopulations.
