Practicum 1 E-module
Weefsels
- 4 grote weefsels: epitheel, bindweefsel(ook bloed), spier en zenuwweefsel
- De oorsprong en locatie van de cel in het weefsel bepaalt de karakteristieken
- Darmen lumen bestaat uit alle 4 de weefsels (zenuwweefsel zit tussen de 2
spierlagen met opvallende perikarya)
Epitheel
- Apicale zijde verantwoordelijk voor verzamelen van voedingsstoffen
- Basale zijde verantwoordelijk voor transport van deze voedingsstoffen naar de
bloedvaten in het bindweefsel
- Eiwit samenstelling van deze 2 membranen verschilt dus
- Lipiden gaan door apicale membraan en worden vervoerd in vesicles naar ER waar
ze gemetaboliseerd worden tot triglycerides. Die worden gecombineerd met eiwitten
in Golgi en vormen chylomicrons. Die worden gesecreteerd door vesicles bij basale
membraan.
- Voedingsstoffen en aminozuren etc. kunnen zelf door membranen zonder vesicle.
- Functies van de cellen worden gereflecteerd door de relatieve hoeveelheden van de
organellen in de cellen.
Organellen
- Secretoire granules: komen van TGN(trans-golgi netwerk) en secreteren materiaal
na signaal
- Endosomen: ontvangen transport vesicles met lysosomen eiwitten van TGN,
endocytische vesicles en autofagosomen. Deze worden getransporteerd naar
lysosomen, TGN of plasmamembraan
- RER: maken van exoplasmic eiwitten(secretoire eiwitten, transmembraan eiwitten en
eiwitten voor lumen of vacuolaire systeem). Transitionele elementen zijn secties van
ER waar vesicles bud off naar golgi
- Golgi: Tubules continu met RER, hierdoor kunnen gesynthetiseerde lipiden naar
transport vesicles van RER
- Golgi complex: cis-zijde(ontvangen vesicles van ER) en trans-zijde(vrijlaten vesicles).
Bevat Trans Golgi Network: network van buizen en vesicles aan de trans-zijde.
Transport vesicles gaan naar plasmamembraan of endosomen. Secretoire vesicles
include constitutieve secretoire membraan vesicles en gereguleerde secretoire
vesicles
- Peroxisomen hebben crystalline inhoud
- Mitochondriën: inner membrane is ingesprongen en vormt cristae
- Nucleus: outermembrane continue met RER. Bestaat uit regionen: nucleolus,
heterochormstin en euchromatin(actief)
Bright field microscoop
- Licht van lamp gaat door condensor lens en valt op sample. Hoeveelheid licht wordt
bepaald door diafragma.
- Structuren in sample verschillen in capaciteit om licht te absorberen of te reflecteren
- Licht gaat door het glas en door de lucht en wordt gebroken en het object wordt dus
vergroot. Het licht wordt opgevangen door objectieve lens en stuurt het naar
occulaire lens. Deze geeft nog meer vergroting
, Elektronenmicroscoop
- Elektronen beam is focused door elektromagnetische lenzen in plaats van glas
lenzen
- Altijd zwart wit want elektronen hebben geen kleur(door te kleine golflengtes) en licht
wel door het absorberen en reflecteren van verschillende golflengtes
H4 en H5 E-module
Immunohistochemistry
- Binding van antilichamen aan antigenen. Deel waaraan antilichaam bindt heet
epitoop
- Immunoperoxidase: antilichamen gebonden aan peroxidase enzym. Antilichaam
wordt in weefsel gebracht en bindt aan antigeen. Substraat heeft enzymatische
reactie met peroxidase waardoor een contrast ontstaat met het omgevende weefsel.
Dit kan je zien onder lichtmicroscoop
- Gouden bolletjes kunnen zowel aan primaire en secundaire antilichamen worden
gekoppeld. Alleen bij elektronenmicroscoop want goud bolletje is kleiner dan 200 nm.
- Synthetische analogen: BrDU kan als bouwblok gebruikt worden voor DNA. Dit blijft
aanwezig zelfs in dochtercellen, waardoor je het hele proces van repliceren kan
volgen. Antilichamen inbrengen met fluorescentie waardoor DNA denaturatie
plaatsvindt, want antilichamen binden aan BrDU waardoor geen DNA meer kan
worden gemaakt. De cellen die je dan ziet zijn dus replicerende cellen of
dochtercellen van de lineage.
- In situ hybridization: gelabled DNA of RNA complementaire streng(probe) in cel
plaatsen. Als de probe wil binden aan DNA dan moet het DNA denaturatie
ondergaan (mbv hitte). Hiermee worden specifieke DNA of RNA sequenties in
weefsels en cellen gelokaliseerd. Manieren zijn: fluorescent DNA in situ hybridization
en gold-facilitated in situ hybridization
- Fluorescent dyes
- MitoTracker: bindt aan mitochondriën
- NIX: antilichaam dat bindt aan specifieke eiwit
- DIC: fase-contrast → geen kleur
Practicum 2
Neoplasie
- Aard
- Maligne
- Sarcoom, carcinoom
- Benigne
- -oom erachter plakken
Weefsels
- 4 grote weefsels: epitheel, bindweefsel(ook bloed), spier en zenuwweefsel
- De oorsprong en locatie van de cel in het weefsel bepaalt de karakteristieken
- Darmen lumen bestaat uit alle 4 de weefsels (zenuwweefsel zit tussen de 2
spierlagen met opvallende perikarya)
Epitheel
- Apicale zijde verantwoordelijk voor verzamelen van voedingsstoffen
- Basale zijde verantwoordelijk voor transport van deze voedingsstoffen naar de
bloedvaten in het bindweefsel
- Eiwit samenstelling van deze 2 membranen verschilt dus
- Lipiden gaan door apicale membraan en worden vervoerd in vesicles naar ER waar
ze gemetaboliseerd worden tot triglycerides. Die worden gecombineerd met eiwitten
in Golgi en vormen chylomicrons. Die worden gesecreteerd door vesicles bij basale
membraan.
- Voedingsstoffen en aminozuren etc. kunnen zelf door membranen zonder vesicle.
- Functies van de cellen worden gereflecteerd door de relatieve hoeveelheden van de
organellen in de cellen.
Organellen
- Secretoire granules: komen van TGN(trans-golgi netwerk) en secreteren materiaal
na signaal
- Endosomen: ontvangen transport vesicles met lysosomen eiwitten van TGN,
endocytische vesicles en autofagosomen. Deze worden getransporteerd naar
lysosomen, TGN of plasmamembraan
- RER: maken van exoplasmic eiwitten(secretoire eiwitten, transmembraan eiwitten en
eiwitten voor lumen of vacuolaire systeem). Transitionele elementen zijn secties van
ER waar vesicles bud off naar golgi
- Golgi: Tubules continu met RER, hierdoor kunnen gesynthetiseerde lipiden naar
transport vesicles van RER
- Golgi complex: cis-zijde(ontvangen vesicles van ER) en trans-zijde(vrijlaten vesicles).
Bevat Trans Golgi Network: network van buizen en vesicles aan de trans-zijde.
Transport vesicles gaan naar plasmamembraan of endosomen. Secretoire vesicles
include constitutieve secretoire membraan vesicles en gereguleerde secretoire
vesicles
- Peroxisomen hebben crystalline inhoud
- Mitochondriën: inner membrane is ingesprongen en vormt cristae
- Nucleus: outermembrane continue met RER. Bestaat uit regionen: nucleolus,
heterochormstin en euchromatin(actief)
Bright field microscoop
- Licht van lamp gaat door condensor lens en valt op sample. Hoeveelheid licht wordt
bepaald door diafragma.
- Structuren in sample verschillen in capaciteit om licht te absorberen of te reflecteren
- Licht gaat door het glas en door de lucht en wordt gebroken en het object wordt dus
vergroot. Het licht wordt opgevangen door objectieve lens en stuurt het naar
occulaire lens. Deze geeft nog meer vergroting
, Elektronenmicroscoop
- Elektronen beam is focused door elektromagnetische lenzen in plaats van glas
lenzen
- Altijd zwart wit want elektronen hebben geen kleur(door te kleine golflengtes) en licht
wel door het absorberen en reflecteren van verschillende golflengtes
H4 en H5 E-module
Immunohistochemistry
- Binding van antilichamen aan antigenen. Deel waaraan antilichaam bindt heet
epitoop
- Immunoperoxidase: antilichamen gebonden aan peroxidase enzym. Antilichaam
wordt in weefsel gebracht en bindt aan antigeen. Substraat heeft enzymatische
reactie met peroxidase waardoor een contrast ontstaat met het omgevende weefsel.
Dit kan je zien onder lichtmicroscoop
- Gouden bolletjes kunnen zowel aan primaire en secundaire antilichamen worden
gekoppeld. Alleen bij elektronenmicroscoop want goud bolletje is kleiner dan 200 nm.
- Synthetische analogen: BrDU kan als bouwblok gebruikt worden voor DNA. Dit blijft
aanwezig zelfs in dochtercellen, waardoor je het hele proces van repliceren kan
volgen. Antilichamen inbrengen met fluorescentie waardoor DNA denaturatie
plaatsvindt, want antilichamen binden aan BrDU waardoor geen DNA meer kan
worden gemaakt. De cellen die je dan ziet zijn dus replicerende cellen of
dochtercellen van de lineage.
- In situ hybridization: gelabled DNA of RNA complementaire streng(probe) in cel
plaatsen. Als de probe wil binden aan DNA dan moet het DNA denaturatie
ondergaan (mbv hitte). Hiermee worden specifieke DNA of RNA sequenties in
weefsels en cellen gelokaliseerd. Manieren zijn: fluorescent DNA in situ hybridization
en gold-facilitated in situ hybridization
- Fluorescent dyes
- MitoTracker: bindt aan mitochondriën
- NIX: antilichaam dat bindt aan specifieke eiwit
- DIC: fase-contrast → geen kleur
Practicum 2
Neoplasie
- Aard
- Maligne
- Sarcoom, carcinoom
- Benigne
- -oom erachter plakken
