Clasificación ABO/Rh - Adulto
Determina el grupo sanguíneo de las personas clasificándolas en A, B, AB y O, lo cual
determina y delimita la terapia transfusional. Incluye prueba directa (antígenos) y prueba
inversa (anticuerpos) y ambas deben ser concordantes, de lo contrario, estamos frente a
una Discrepancia ABO. Urgencia transfusional: Transfundir glóbulos rojos O y plasma
fresco congelado AB. Para validar muestra se debe hacer clasificación ABO/Rh + Test de
Coombs Indirecto.
Lámina:
- Rotular portaobjetos con: Anti-A, Anti-B y Anti-D
- Poner con pipeta Pasteur una gota de antisueros anti-A, anti-B y anti-D.
- Poner una gota de sangre en las gotas con antisuero y mezclar
- Observar aglutinación en fuente de luz
Tubo:
- Rotular 6 tubos de Khan, uno para la suspensión, 3 para prueba directa (Anti-A, Anti-B y
Anti-D) y 2 para la prueba inversa (A1 y B)
- Preparar suspensión al 2-5%: 25 ul de glóbulos rojos + 500 ul de PBS
- Poner una gota de antisuero Anti-A, Anti-B y Anti-D en los tubos correspondientes y
agregar una gota de suspensión
- Poner una gota de glóbulos rojos testigos A1 y B en tubos correspondientes y agregar 2
gotas de plasma
- Centrifugar por 30 seg a 1500 rpm
- Leer aglutinación en fuente de luz, resuspendiendo y girando los tubos para desprender
el botón celular.
- Registrar resultado en cruces e interpretar
Gel:
- Rotular gel en posición vertical
- Preparar suspensión al 5%: 25 ul de glóbulos rojos + 500 ul de diluyente 2
- Poner con micropipeta 10 ul de suspensión en los primeros 4 pocillos (A, B, DVI y ctl)
- Poner 50 ul de glóbulos rojos testigos A1 y B en los últimos 2 pocillos (A1 y B) y agregar
50 ul de plasma
- Centrifugar por 10 min a 1060 rpm
- Registrar resultado en cruces e interpretar
Clasificación ABO/Rh – Recién nacido
En RN solo se realiza la prueba directa ya que no tienen anticuerpos naturales hasta los 6
meses aprox. Para validar muestra se debe hacer clasificación ABO/Rh + Test de Coombs
directo.
Gel:
- Rotular gel en posición vertical
- Preparar suspensión al 1%: 10 ul de glóbulos rojos + 1000 ul de diluyente 2
- Poner 50 ul de suspensión en los 6 pocillos: A, B, AB, D, ctl y DAT (TCD)
- Centrifugar por 10 min a 1060 rpm
, - Registrar resultados en cruces e interpretar
Resultados Clasificación ABO/Rh en tubo:
Intensidad de reacción Aglutinación en tubo
4+ Botón único, fondo claro, sin células libres
3+ Varios aglutinados de gran tamaño, fondo claro, sin células libres
2+ Muchos aglutinados de mediano tamaño, fondo claro, sin células libres
1+ Numerosos aglutinados pequeños, fondo turbio por GR libres
+/- Apenas la aglutinación es visible, fondo turbio por GR libres
- Ausencia de aglutinación
Grados de aglutinación en gel:
Tarjeta ABO/D Adulto Tarjeta ABO/D RN Reclasificación ABO/D
Variante Rh
Algunas personas podrían presentar una variante Rh D ya sea débil o parcial, lo que podría
generar resultados falsos negativos. Para validar un resultado negativo o si da menor a 2+
se debe hacer un estudio de variante Rh junto con un Test de Coombs directo.
Tubo:
- Al tubo Anti-D que previamente dio Rh negativo, agregar una gota de suero anti D
confirmación (IgG Anti D)
- Agregar una gota de LISS e incubar por 15 min a 37°C
- Centrifugar por 30 seg a 1500 rpm
Determina el grupo sanguíneo de las personas clasificándolas en A, B, AB y O, lo cual
determina y delimita la terapia transfusional. Incluye prueba directa (antígenos) y prueba
inversa (anticuerpos) y ambas deben ser concordantes, de lo contrario, estamos frente a
una Discrepancia ABO. Urgencia transfusional: Transfundir glóbulos rojos O y plasma
fresco congelado AB. Para validar muestra se debe hacer clasificación ABO/Rh + Test de
Coombs Indirecto.
Lámina:
- Rotular portaobjetos con: Anti-A, Anti-B y Anti-D
- Poner con pipeta Pasteur una gota de antisueros anti-A, anti-B y anti-D.
- Poner una gota de sangre en las gotas con antisuero y mezclar
- Observar aglutinación en fuente de luz
Tubo:
- Rotular 6 tubos de Khan, uno para la suspensión, 3 para prueba directa (Anti-A, Anti-B y
Anti-D) y 2 para la prueba inversa (A1 y B)
- Preparar suspensión al 2-5%: 25 ul de glóbulos rojos + 500 ul de PBS
- Poner una gota de antisuero Anti-A, Anti-B y Anti-D en los tubos correspondientes y
agregar una gota de suspensión
- Poner una gota de glóbulos rojos testigos A1 y B en tubos correspondientes y agregar 2
gotas de plasma
- Centrifugar por 30 seg a 1500 rpm
- Leer aglutinación en fuente de luz, resuspendiendo y girando los tubos para desprender
el botón celular.
- Registrar resultado en cruces e interpretar
Gel:
- Rotular gel en posición vertical
- Preparar suspensión al 5%: 25 ul de glóbulos rojos + 500 ul de diluyente 2
- Poner con micropipeta 10 ul de suspensión en los primeros 4 pocillos (A, B, DVI y ctl)
- Poner 50 ul de glóbulos rojos testigos A1 y B en los últimos 2 pocillos (A1 y B) y agregar
50 ul de plasma
- Centrifugar por 10 min a 1060 rpm
- Registrar resultado en cruces e interpretar
Clasificación ABO/Rh – Recién nacido
En RN solo se realiza la prueba directa ya que no tienen anticuerpos naturales hasta los 6
meses aprox. Para validar muestra se debe hacer clasificación ABO/Rh + Test de Coombs
directo.
Gel:
- Rotular gel en posición vertical
- Preparar suspensión al 1%: 10 ul de glóbulos rojos + 1000 ul de diluyente 2
- Poner 50 ul de suspensión en los 6 pocillos: A, B, AB, D, ctl y DAT (TCD)
- Centrifugar por 10 min a 1060 rpm
, - Registrar resultados en cruces e interpretar
Resultados Clasificación ABO/Rh en tubo:
Intensidad de reacción Aglutinación en tubo
4+ Botón único, fondo claro, sin células libres
3+ Varios aglutinados de gran tamaño, fondo claro, sin células libres
2+ Muchos aglutinados de mediano tamaño, fondo claro, sin células libres
1+ Numerosos aglutinados pequeños, fondo turbio por GR libres
+/- Apenas la aglutinación es visible, fondo turbio por GR libres
- Ausencia de aglutinación
Grados de aglutinación en gel:
Tarjeta ABO/D Adulto Tarjeta ABO/D RN Reclasificación ABO/D
Variante Rh
Algunas personas podrían presentar una variante Rh D ya sea débil o parcial, lo que podría
generar resultados falsos negativos. Para validar un resultado negativo o si da menor a 2+
se debe hacer un estudio de variante Rh junto con un Test de Coombs directo.
Tubo:
- Al tubo Anti-D que previamente dio Rh negativo, agregar una gota de suero anti D
confirmación (IgG Anti D)
- Agregar una gota de LISS e incubar por 15 min a 37°C
- Centrifugar por 30 seg a 1500 rpm
