HET BEPALEN VAN DE PLAATS
EN CONCENTRATIE VAN ALAT
EN ASAT
In levercellen
11 DECEMBER 2015
Danique Hsu
VP1H05
Docent: Arie Jaak Verkade
, Hoofdstuk 1: Inleiding
1.1: Doel van de proef
Na fractionering van de levercel wordt onderzocht in welk waar de
enzymen ALAT en ASAT zich in de levercel bevinden. Tevens wordt bepaald
hoeveel er van beide enzymen in de levercel aanwezig zijn.
1.2: Theoretische achtergronden
Alanine-aminotransferase (ALAT) en asparaat-aminotransferase (ASAT) zijn
enzymen. Het meten van beide enzymen wordt vaak gebruikt om
leverschade aan te tonen. De verhouding tussen de enzymen ALAT en
ASAT kan ook aangeven wat voor een type beschadiging de lever heeft. Bij
beschadiging van de lever lekken de enzymen weg vanuit de levercellen
naar het bloed.
Door het differentieel centrifugeren van levercel, kunnen de subcellulaire
componenten (membranen, kernen, lysosomen, etc.) beter worden
onderzocht. Hiervoor moeten stukjes leverweefsel worden fijngewreven,
waardoor ze later gaan sedimenteren en de inhoud moet dat verdeeld zijn
over 5 (nog niet volledig zuivere) fracties:
- Celkernen, intacte cellen, erytrocyten en stukjes celmembraan
- Mitochondriën
- Lysosomen
- Microsomen
- Cytoplasma
Enzymen die uitsluitend in één organel voorkomen, worden
markerenzymen genoemd. Maar het kan ook voorkomen dat een enzym
niet specifiek is voor één organel. Als zo’n enzym zich in een organel met
een membraanomhulsel bevindt, is de enzymactiveitsmeting niet goed
mogelijk. Dat komt doordat niet alle substraten door de membraan
doordringen.
2
EN CONCENTRATIE VAN ALAT
EN ASAT
In levercellen
11 DECEMBER 2015
Danique Hsu
VP1H05
Docent: Arie Jaak Verkade
, Hoofdstuk 1: Inleiding
1.1: Doel van de proef
Na fractionering van de levercel wordt onderzocht in welk waar de
enzymen ALAT en ASAT zich in de levercel bevinden. Tevens wordt bepaald
hoeveel er van beide enzymen in de levercel aanwezig zijn.
1.2: Theoretische achtergronden
Alanine-aminotransferase (ALAT) en asparaat-aminotransferase (ASAT) zijn
enzymen. Het meten van beide enzymen wordt vaak gebruikt om
leverschade aan te tonen. De verhouding tussen de enzymen ALAT en
ASAT kan ook aangeven wat voor een type beschadiging de lever heeft. Bij
beschadiging van de lever lekken de enzymen weg vanuit de levercellen
naar het bloed.
Door het differentieel centrifugeren van levercel, kunnen de subcellulaire
componenten (membranen, kernen, lysosomen, etc.) beter worden
onderzocht. Hiervoor moeten stukjes leverweefsel worden fijngewreven,
waardoor ze later gaan sedimenteren en de inhoud moet dat verdeeld zijn
over 5 (nog niet volledig zuivere) fracties:
- Celkernen, intacte cellen, erytrocyten en stukjes celmembraan
- Mitochondriën
- Lysosomen
- Microsomen
- Cytoplasma
Enzymen die uitsluitend in één organel voorkomen, worden
markerenzymen genoemd. Maar het kan ook voorkomen dat een enzym
niet specifiek is voor één organel. Als zo’n enzym zich in een organel met
een membraanomhulsel bevindt, is de enzymactiveitsmeting niet goed
mogelijk. Dat komt doordat niet alle substraten door de membraan
doordringen.
2
