🥼
HC Week 4 Analyse methoden
Chromatografie - TLC, HPLC en GC
Kan uitleg geven van de principes van chromatografie - TLC, HPLC en GC
Kan verschillende forensische chromatografie technieken (her-) kennen,
toelichten en toepassen
Kan berekeningen uitvoeren ten behoeve van chromatografische bepalingen
Chromatografie is een techniek waarmee mengsels van verschillende stoffen
gescheiden kunnen worden
De Rf waarde is uniek voor een bepaalde component in een bepaalde concentratie en
samenstelling bij een bepaalde meting. De Rf waarde is de vertragingsfactor = a/b.
De Rf waarde verteld je hoe ver een compound is gereisd ten opzichte van de
vloeistof
HC Week 4 Analyse methoden 1
, Loopafstand front is b en staat voor de afgelegde
afstand van de vloeistof. Loopafstand blauwe
component is a. Onder de start is de mobiele fase
(eluens), erboven is stationair. Deze methode is
TLC
TLC is een methode dat is gebaseerd op oplosbaarheden en de scheiding daarvan op
polariteit. De silica gel bestaat uit silicon dioxide met OH groepen aan de buitenkant,
deze kunnen dipool dipool bindingen aangaan.
Polaire compounds zullen sterke verbindingen aangaan met de silica, hierdoor worden
ze afgeremd omdat ze sterk worden geadsorbeerd in de stationaire fase. Apolaire
compounds gaan niet zulke sterke verbindingen aan en kunnen makkelijker bewegen.
De kleuren worden vaak pas zichtbaar op de silica gel als ze worden beschenen met
UV-licht.
Kolomchromatografie : door een buis te vullen met je stationaire fase en daar een
mobiele fase langs te leiden kan je chromatografie uitvoeren. Dit kan met verschillende
principes :
Koppelen we de kolom aan een apparaat (met druk) dan wordt dat HPLC genoemd
(High Performance Pressure Liquid Chromatography)
Analytisch : Identificatie en kwantificatie van componenten
Preparatief : Zuiveren of isoleren van een component
De scheiding vind plaats op basis van oplosbaarheid (verdelingschromatografie),
adsorptie (adsorptiechromatografie), ionlading, molecuulgrootte (exclusie =
uitsluiting) en affiniteit (enzym/substraat)
HC Week 4 Analyse methoden 2
HC Week 4 Analyse methoden
Chromatografie - TLC, HPLC en GC
Kan uitleg geven van de principes van chromatografie - TLC, HPLC en GC
Kan verschillende forensische chromatografie technieken (her-) kennen,
toelichten en toepassen
Kan berekeningen uitvoeren ten behoeve van chromatografische bepalingen
Chromatografie is een techniek waarmee mengsels van verschillende stoffen
gescheiden kunnen worden
De Rf waarde is uniek voor een bepaalde component in een bepaalde concentratie en
samenstelling bij een bepaalde meting. De Rf waarde is de vertragingsfactor = a/b.
De Rf waarde verteld je hoe ver een compound is gereisd ten opzichte van de
vloeistof
HC Week 4 Analyse methoden 1
, Loopafstand front is b en staat voor de afgelegde
afstand van de vloeistof. Loopafstand blauwe
component is a. Onder de start is de mobiele fase
(eluens), erboven is stationair. Deze methode is
TLC
TLC is een methode dat is gebaseerd op oplosbaarheden en de scheiding daarvan op
polariteit. De silica gel bestaat uit silicon dioxide met OH groepen aan de buitenkant,
deze kunnen dipool dipool bindingen aangaan.
Polaire compounds zullen sterke verbindingen aangaan met de silica, hierdoor worden
ze afgeremd omdat ze sterk worden geadsorbeerd in de stationaire fase. Apolaire
compounds gaan niet zulke sterke verbindingen aan en kunnen makkelijker bewegen.
De kleuren worden vaak pas zichtbaar op de silica gel als ze worden beschenen met
UV-licht.
Kolomchromatografie : door een buis te vullen met je stationaire fase en daar een
mobiele fase langs te leiden kan je chromatografie uitvoeren. Dit kan met verschillende
principes :
Koppelen we de kolom aan een apparaat (met druk) dan wordt dat HPLC genoemd
(High Performance Pressure Liquid Chromatography)
Analytisch : Identificatie en kwantificatie van componenten
Preparatief : Zuiveren of isoleren van een component
De scheiding vind plaats op basis van oplosbaarheid (verdelingschromatografie),
adsorptie (adsorptiechromatografie), ionlading, molecuulgrootte (exclusie =
uitsluiting) en affiniteit (enzym/substraat)
HC Week 4 Analyse methoden 2
