Chapter 5 ‘Microbial Biotechnology’
1. Kunnen aangeven welke soorten micro-organismen er zijn en wat hun belang is voor de
biotechnologie.
2 groepen micro-organismen:
- Prokaryoten: bacteriën en archaea
- Eukaryoten: schimmels en protisten (o.a. algen)
Hun belang voor de biotechnologie:
- Enorme diversiteit en metabolische diversiteit
- Snelle groei
- Genetisch toegankelijk: je kan nieuwe genen inbrengen/veranderen/uitschakelen, etc.
2. De globale opbouw van bacteriën kunnen beschrijven.
Prokaryoot: geen celkern en organellen, wel een celwand.
3 veel voorkomende vormen:
- Coccen (bolvormig)
- Bacillen (staafvormig)
- Spirocheten (spiraalvormig)
3. Kunnen uitleggen wat het verschil is tussen een gram-positieve en een gram-negatieve bacterie.
Gram-positief: kleurt donkerpaars heeft een dikke laag peptidoglycaan.
Gram-negatief: kleurt lichtroze heeft een dunne laag peptidoglycaan, maar wel 2 membranen ter
bescherming. Deze bestaan uit fosfolipiden en lipopolysachariden.
4. Kunnen aangeven wat de functie is van fermentatie voor de cel, welke twee vormen van fermentatie
er zijn en van iedere vorm 3 voorbeelden kunnen noemen van producten die erdoor gemaakt worden.
Functie: afbreken van pyruvaat bij afwezigheid van zuurstof.
2 vormen van fermentatie:
- Melkzuurfermentatie: pyruvaat melkzuur
o Melkzuur: gebruikt voor maken van bijv. yoghurt.
- Alcoholfermentatie: pyruvaat alcohol + CO2
o Alcohol: gebruiken voor maken van alcoholische dranken.
o CO2: gebruiken voor rijzen van deeg.
5. 5 voorbeelden kunnen noemen van nuttige microbiële enzymen en hun toepassingen.
- Moleculair onderzoek: restrictie-enzymen, ligase, Taq-polymerase
- Cellullase: bleken van spijkerbroeken
- Protease: worden toegevoegd aan wasmiddelen (afbreken eiwitten en vetten), bier
- Lactase: lactose vrije melk
6. Kunnen aangeven wat het belang is van thermofiele Archaea en hun enzymen en wat op dit moment
de hoogste temperatuur is waarbij leven mogelijk is.
Deze enzymen zijn stabiel bij hoge temperaturen. Thermofielen = organismen die leven bij een hoge
temperatuur. De hoogste temperatuur op dit moment waarbij leven mogelijk is: 121 graden Celsius.
7. Stap voor stap kunnen opnoemen hoe transformatie van bacteriën wordt uitgevoerd m.b.v. de CaCl2
methode en kunnen uitleggen wat competente cellen zijn.
- Cellen opnemen in ijskoude CaCl2-oplossing.
- Transformeren: mengen van competente cellen en plasmide wat je wilt inbrengen, en op ijs
zetten.
- Korte hitte shock (42 graden Celsius) voor 1 minuut: plasmide wordt opgenomen.
- Toevoegen van medium en cellen 1 uur incuberen bij 37 graden Celsius.
- Uitplaten van cellen op voedingsbodem met antibioticum.
1