Vascular Biology Evelien Floor
Exosomen en micropartikels
Er zijn verschillende vormen van
communicatie in het lichaam: direct
cel-cel contact, cel-matrix interactie,
hormonen voor lange afstanden en
elektrische en chemische signalen.
Daarnaast is er ook vesicle
communicatie. In het geval van stress
worden verschillende soorten
vesicles uitgescheiden door de cel:
• Secretie vesicles
o Geven stoffen af aan
de omgeving door
fusie met het
plasmamembraan
• Microvesicles
o Vesicles met stoffen
die ontstaan door
blebbing van de
membraan
• Exosomen
o Worden gevormd
vanuit de vroege endosomen en komen vrij door fusie van de multivesicular bodies
(MVB) met het plasmamembraan
• Apoptotische lichamen
o Nemen grote partikels en cel resten van buitenaf op
Van deze vesicles zijn exosomen het kleinst,
daarna de microvesicles en als laatste de
apoptotische lichamen. Oncosomen zijn nog
groter dan apoptotische lichamen, dit zijn van
tumor afkomstige vesicles. De vesicles bevatten
een bilipide membraan en drijven daarom in
oplossing. Door de verschillende dichtheden en
het gegeven dat ze drijven kunnen de vesicles
gescheiden worden. Echter omdat de vesicles zo
klein zijn is besmetting een groot gevaar.
Scheidingstechnieken
Precipitatie
Een polymeer wordt toegevoegd aan de
vloeistof. Door dit vervolgens af te
draaien zullen de grote delen neerslaan in
de draden van de polymeer en in het
pellet terecht komen. In het supernatant
bevinden zich dan de kleine deeltjes.
Differentiële ultracentrifugatie
Verschillende stappen van centrifugatie
zorgen ervoor dat grote en kleine deeltjes
gescheiden kunnen worden.
1
Exosomen en micropartikels
Er zijn verschillende vormen van
communicatie in het lichaam: direct
cel-cel contact, cel-matrix interactie,
hormonen voor lange afstanden en
elektrische en chemische signalen.
Daarnaast is er ook vesicle
communicatie. In het geval van stress
worden verschillende soorten
vesicles uitgescheiden door de cel:
• Secretie vesicles
o Geven stoffen af aan
de omgeving door
fusie met het
plasmamembraan
• Microvesicles
o Vesicles met stoffen
die ontstaan door
blebbing van de
membraan
• Exosomen
o Worden gevormd
vanuit de vroege endosomen en komen vrij door fusie van de multivesicular bodies
(MVB) met het plasmamembraan
• Apoptotische lichamen
o Nemen grote partikels en cel resten van buitenaf op
Van deze vesicles zijn exosomen het kleinst,
daarna de microvesicles en als laatste de
apoptotische lichamen. Oncosomen zijn nog
groter dan apoptotische lichamen, dit zijn van
tumor afkomstige vesicles. De vesicles bevatten
een bilipide membraan en drijven daarom in
oplossing. Door de verschillende dichtheden en
het gegeven dat ze drijven kunnen de vesicles
gescheiden worden. Echter omdat de vesicles zo
klein zijn is besmetting een groot gevaar.
Scheidingstechnieken
Precipitatie
Een polymeer wordt toegevoegd aan de
vloeistof. Door dit vervolgens af te
draaien zullen de grote delen neerslaan in
de draden van de polymeer en in het
pellet terecht komen. In het supernatant
bevinden zich dan de kleine deeltjes.
Differentiële ultracentrifugatie
Verschillende stappen van centrifugatie
zorgen ervoor dat grote en kleine deeltjes
gescheiden kunnen worden.
1