Histotechnieken
Les 1
Chemische fixatief formaldehyde zorgt voor een goede morfologie en een slechte
antigeniciteit.
Anitgeniciteit = zijn de antigenen nog bereikbaar en de enzymactiviteit.
Fysische fixatief loeibare stikstok. Zorgt voor slechte morfologie en een goeie
antigeniciteit.
Als je verschillende histologische kleuringen wilt gaan doen dan kun je het beste een
chemisch fixatief gebruiken. Als je de enzymen willen bekijken dan is de beste optie het
fysische fixatief.
Prostaten worden geïnkt, alle kanten van het weefsel krijgt iedere een andere kleur. Zo kant
de patholoog onder de microscoop precies zien waar bijv. de tumor aanwezig is door middel
van de verschillende kleuren.
Van mama tumoren (borst biopten) wordt er een röntgenfoto gemaakt omdat de kleur van
het weefsel veelal geel is en de tumoren wit/geel. Hierdoor is het macroscopisch moeilijk te
zien.
Het doorvoeren en inbedden kan al automatisch maar dit wordt gedaan als er heel veel
weefsel zijn. De moeilijke weefsels zoals de huid of darmweefsel dit blijft over voor de
analist.
Vriescoupes wordt vaak gesneden voor de spoeddienst (snel diagnostiek).
Bij binnen komst van het materiaal tot onder de microscoop moet binnen 10-15 minuten de
uitslag bekend zijn.
Vloeibare stikstof heeft een 0 tot -14 graden. Het moet goed worden ingevroren anders is
het patiëntmateriaal beschadigd en kan het niet meer goed worden beoordeeld.
Bij het inbedden is het belangrijk je goed inbed.
Bij de huid en darmen is het belangrijk dat je gericht inbed. Dit is alleen belangrijk bij het
weefsel waarvan het bestaat uit meerdere lagen.
De tumor die in de basaalmembraan blijft is makkelijker voor de arts te verwijderen en is
voor de patiënt een betere
Van het parafineblokje wordt er een parafine coupe gesneden door het microtoom van
ongeveer een dikte van 5-7 mu dikte. Hieruit wordt een klein stukje coupe gebruikt en wordt
er daarna een kleuring uitgevoerd.
De HE-kleuring wordt ongeveer voor 80% uitgevoerd en wordt een diagnose.
, De zilver kleuring wordt niet door een machine uitgevoerd omdat het belangrijk is of er
anders heel makkelijk een verontreinigen kan plaatsen.
Weefselverwerking stappen:
1. Macroscopische analyse
2. Uitsnijden (vaak grote materialen)
3. Fixeren
4. Doorvoeren (water onttrekken en doordringen met paraffine)
5. Inbedden
6. Paraffine coupes snijden
7. Paraffine coupes plakken (ontdoen van paraffine en dehydreren met water)
8. Kleuren
9. Microscopische analyse
De basis kleuring de HE kleuring
De proxitalbe tubulus heeft een iets dikkere buiten laag en de dixtable tubulus heeft een
dunnere buiten laag.
Immuunhistochemie kleuring
Specifieke antigenen in het weefstel detecteren door middel van antilichamen.
Synaptopodin zit alleen in een podocyt.
Les 1
Chemische fixatief formaldehyde zorgt voor een goede morfologie en een slechte
antigeniciteit.
Anitgeniciteit = zijn de antigenen nog bereikbaar en de enzymactiviteit.
Fysische fixatief loeibare stikstok. Zorgt voor slechte morfologie en een goeie
antigeniciteit.
Als je verschillende histologische kleuringen wilt gaan doen dan kun je het beste een
chemisch fixatief gebruiken. Als je de enzymen willen bekijken dan is de beste optie het
fysische fixatief.
Prostaten worden geïnkt, alle kanten van het weefsel krijgt iedere een andere kleur. Zo kant
de patholoog onder de microscoop precies zien waar bijv. de tumor aanwezig is door middel
van de verschillende kleuren.
Van mama tumoren (borst biopten) wordt er een röntgenfoto gemaakt omdat de kleur van
het weefsel veelal geel is en de tumoren wit/geel. Hierdoor is het macroscopisch moeilijk te
zien.
Het doorvoeren en inbedden kan al automatisch maar dit wordt gedaan als er heel veel
weefsel zijn. De moeilijke weefsels zoals de huid of darmweefsel dit blijft over voor de
analist.
Vriescoupes wordt vaak gesneden voor de spoeddienst (snel diagnostiek).
Bij binnen komst van het materiaal tot onder de microscoop moet binnen 10-15 minuten de
uitslag bekend zijn.
Vloeibare stikstof heeft een 0 tot -14 graden. Het moet goed worden ingevroren anders is
het patiëntmateriaal beschadigd en kan het niet meer goed worden beoordeeld.
Bij het inbedden is het belangrijk je goed inbed.
Bij de huid en darmen is het belangrijk dat je gericht inbed. Dit is alleen belangrijk bij het
weefsel waarvan het bestaat uit meerdere lagen.
De tumor die in de basaalmembraan blijft is makkelijker voor de arts te verwijderen en is
voor de patiënt een betere
Van het parafineblokje wordt er een parafine coupe gesneden door het microtoom van
ongeveer een dikte van 5-7 mu dikte. Hieruit wordt een klein stukje coupe gebruikt en wordt
er daarna een kleuring uitgevoerd.
De HE-kleuring wordt ongeveer voor 80% uitgevoerd en wordt een diagnose.
, De zilver kleuring wordt niet door een machine uitgevoerd omdat het belangrijk is of er
anders heel makkelijk een verontreinigen kan plaatsen.
Weefselverwerking stappen:
1. Macroscopische analyse
2. Uitsnijden (vaak grote materialen)
3. Fixeren
4. Doorvoeren (water onttrekken en doordringen met paraffine)
5. Inbedden
6. Paraffine coupes snijden
7. Paraffine coupes plakken (ontdoen van paraffine en dehydreren met water)
8. Kleuren
9. Microscopische analyse
De basis kleuring de HE kleuring
De proxitalbe tubulus heeft een iets dikkere buiten laag en de dixtable tubulus heeft een
dunnere buiten laag.
Immuunhistochemie kleuring
Specifieke antigenen in het weefstel detecteren door middel van antilichamen.
Synaptopodin zit alleen in een podocyt.
