Samenvatting Microbiologie Vaardigheden

\\\\CCZSAMENVATTING MICROBIOLOGIE PRAKTIJK

2017-2018

,Inhoudsopgave\\
\\\\cczSamenvatting microbiologie praktijk..................................................................................................................1
Principe van de gramkleuring.....................................................................................................................................3
Platen kweken............................................................................................................................................................3
Principe voedingmedium in de platen........................................................................................................................3
Bloedagar...............................................................................................................................................................3
Chocoladeagar........................................................................................................................................................4
Brilliance UTI plaat.................................................................................................................................................5
Brilliance ESBL (Extended Spectrum B-LACTAMASE) (chromogene plaat): Extended Spectrum B-lactamase
produceren organisme...........................................................................................................................................5
De 16 bacteriestammen.............................................................................................................................................6
BIOCHEMISCHE REACTIES TER IDENTIFICATIE..........................................................................................................15
De Katalase test....................................................................................................................................................15
De Coagulase test (gebonden coagulase)............................................................................................................15
De Optochine test................................................................................................................................................15
Gal-esculine test...................................................................................................................................................15
Zout tolerantie test..............................................................................................................................................16
Streptex................................................................................................................................................................16
DETERMINATIE VAN HAEMOPHILUS INFLUENZAE..............................................................................................16
OXIDASE TEST.......................................................................................................................................................17
API 20 E.................................................................................................................................................................18
CEFINASE TEST......................................................................................................................................................19
VITEK 2..................................................................................................................................................................19
GEVOELIGHEIDSBEPALING (DISKDIFFUSIE METHODE)........................................................................................20
Totale overzicht van de testen en uitslagen.............................................................................................................21
Flowchart gram-positieve coccen.............................................................................................................................22
Flowchart gram-negatieve staven............................................................................................................................23




2

, PRINCIPE VAN DE GRAMKLEURING

 Grampreparaat Gefixeerd
 1e kleuring kristalviolet  preparaat blauw-paars
 Lugoloplossing  donkerpaars kristalviolet-lugol-complex
 96'% ethanol complex uit de celwand van de Gram-negatieve bacteriën te wassen is,
maar niet uit die van de Gram-positieven. De dikke peptidoglycaanlaag van de Gram-
positieven krimpt o.i.v. ethanol, zodat het complex in deze laag gevangen blijft.
 Uitspoelen van ethanol met water
 Nakleuren met basische fuchsine (rood)
 Gram-positieven  paars en Gram-negatieven  roze/rood


PLATEN KWEKEN.

Bloedagarplaat: Op 37 graden inzetten aeroob in de stoof.
Chocolade-agar plaat: Op 37 graden met CO2
MacConkey plaat: Op 37 graden aeroob in de stoof.


PRINCIPE VOEDINGMEDIUM IN DE PLATEN.



BLOEDAGAR
Verhit en afgekoelde vleesbouillonagar + gedefibrineerd schapenbloed  platen of buizen.
Bloedagar is verrijkt met en heeft een differentieel medium. Hierdoor worden specifieke
organismen geïsoleerd en hemolyse gedetecteerd.


Het is een verrijkte, niet-selectieve differentiële medium dat ondersteunt de groei van een
verscheidenheid van bacteriën en hemolytische activiteit van het micro-organisme kan worden
gedetecteerd.


HEMOLYSE:
- α-hemolyse betekent dat er deels rode bloedcellen wordt afgebroken. A-hemolyse
presenteert met een kleurverandering in de aanvankelijk rood agar een zeer
donkergroene kleur. Dit blijkt uit de oxidatie van hemoglobine tot methemoglobine met
waterstofperoxide uitgescheiden door de bacteriën.
- β-hemolyse is complete lysis van de rode bloedcellen. Het presenteert als een
transparante, gele kleur op het bloed agar-medium. Dit soort hemolyse optreedt als
gevolg van een enzym geproduceerd door bacteriën genaamd streptolysin. Dit enzym
interageert met cholesterol in het cellulaire membraan als gevolg verslechtering van
deze beschermende cellulaire structuur.


3