Hoofdstuk 4: Effect van de zuurtegraad en de temperatuur op de enzymatische reactie
Effect van de pH op de enzymatische reactie
Enzymatische activiteit is pH afhankelijk als gevolg van de ioniseerbare aminozuur-zijketens in de
actieve site en vertoont klokvormige verandering
Optimale pH = pH bij maximale activiteit (pH0) -> elk enzym heeft zijn eigen pH optimum
Ioniseerbare aminozuur-zijketens in actieve site kunnen worden geprotoneerd of gedeprotoneerd bij
verschillende pH’s afhankelijk van hun pKa waarde -> enzym is inactief
KaB > KaA: B deprotoneerd voor A
wanneer pH progressief stijgt van zure
naar basische pH
AZ met lage pKa (sterk zuur): steeds gedeprotoneerd bij pH7
AZ met hoge pKa (zwak zuur): steeds geprotoneerd bij pH7
Andere pH-effecten:
Protonen kunnen nodig zijn voor of gevormd worden tijdens de enzymatische reactie -> pH
kan veranderen naarmate de reactie doorgaat vb. dehydrogenasen
Substraat of product kan ioniseerbaar zijn -> als geïoniseerde substraat beter aan enzym
bindt zal reactiesnelheid verhogen
Ionisatie van zijketens van AZ niet gelegen in actief centrum kunnen structuur van actief
centrum veranderen en reactiesnelheid beïnvloeden
Het model van Waley
Enzym bestaat in 3 ionisatievormen: E, EH1 en EH1H2 enkel EH1
katalytisch actief
Ka1 = Ka3 en Ka2 = Ka4 als binding substraat
geen effect heeft op dissociatieconstante van
de protonen van de betrokken AZ zijketens
Effect van de pH op de enzymatische reactie
Enzymatische activiteit is pH afhankelijk als gevolg van de ioniseerbare aminozuur-zijketens in de
actieve site en vertoont klokvormige verandering
Optimale pH = pH bij maximale activiteit (pH0) -> elk enzym heeft zijn eigen pH optimum
Ioniseerbare aminozuur-zijketens in actieve site kunnen worden geprotoneerd of gedeprotoneerd bij
verschillende pH’s afhankelijk van hun pKa waarde -> enzym is inactief
KaB > KaA: B deprotoneerd voor A
wanneer pH progressief stijgt van zure
naar basische pH
AZ met lage pKa (sterk zuur): steeds gedeprotoneerd bij pH7
AZ met hoge pKa (zwak zuur): steeds geprotoneerd bij pH7
Andere pH-effecten:
Protonen kunnen nodig zijn voor of gevormd worden tijdens de enzymatische reactie -> pH
kan veranderen naarmate de reactie doorgaat vb. dehydrogenasen
Substraat of product kan ioniseerbaar zijn -> als geïoniseerde substraat beter aan enzym
bindt zal reactiesnelheid verhogen
Ionisatie van zijketens van AZ niet gelegen in actief centrum kunnen structuur van actief
centrum veranderen en reactiesnelheid beïnvloeden
Het model van Waley
Enzym bestaat in 3 ionisatievormen: E, EH1 en EH1H2 enkel EH1
katalytisch actief
Ka1 = Ka3 en Ka2 = Ka4 als binding substraat
geen effect heeft op dissociatieconstante van
de protonen van de betrokken AZ zijketens